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2024-3-14

一、精選內毒素更低批次細胞對內毒素非常敏感，過高的內毒素可誘導細胞釋放炎癥因子、引導細胞衰老或凋亡。不僅如此，胎牛血清會經常或長時間作用于細胞，一旦內毒素含量過高，細胞相當于長期在“有在毒培養基”中生長，被內毒素影響，細胞將處于“亞健康狀態”，進而影響實驗結果的穩定與準確性。因此，為保證細胞的健康，在培養細胞時，應該選用內毒素含量盡可能低的血清，以保障實驗的順利進行。Ausbian®進口特級胎牛血清，選擇內毒素含量≤3EU/ml，澳洲進口血源，曾經是細胞典藏等重大項目...

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你知道細胞培養操作過程有什么嗎？注意無菌。無論哪一管液體，開蓋后盡量立即關上（如果有幾瓶都需要開的，也注意，可以虛蓋）。蓋子向上放。操作時不要從開蓋的容器上方經過。另外，無菌臺面上擺放的各種東西，最好是一字擺開，平行于自己。盡量不要前后重疊。細胞操作中所用的所有耗材試劑最好都是細胞培養專用。一般都以一次性耗材居多。1ML槍頭為加長型專用培養槍頭。移液管亦有專用10mL一次性無菌移液管（1）細胞換液：培養皿/瓶用槍頭或移液管吸去原培養液，加入新培養液。（2）細胞傳代：傳代之前先觀察，細胞是否密集，是否開始融合... 查看詳情 2022-04-29
細胞培養注意事項有哪些（基礎級）總的原則：無菌操作、保證細胞培養環境的穩定性按時間順序整理1、細胞房和生物安全柜（或超凈工作臺）先開紫外照射30min。作用：對環境滅菌（空氣）。（備注：如果著急，至少也要開15分鐘）在做實驗之前考慮好需要哪些物品。開始照射之前，將所需要用到的物品都放到生物安全柜（或超凈工作臺）里面。常用移液槍或電動移液器等，需要在工作臺上放置一套專用設備。細胞培養箱一般都已經調整好。定期留意一下二氧化碳是否足夠。不夠及時更換。2、顯微鏡需要定期消毒酒精擦拭。注意：顯微鏡一般都放在細胞房。3... 查看詳情 2022-04-29
常規細胞實驗大匯總~細胞凋亡實驗在很多課題中，細胞實驗都是*的。除了之前我們介紹的細胞復蘇、傳代和凍存這“基礎三件套”之外，還有許多常見的操作，需要我們了解甚至是熟練掌握。磷脂酰絲氨酸外翻分析：又叫做AnnexinV法，常用來檢測細胞凋亡。檢測原理：磷脂酰絲氨酸(Phosphatidylserine,PS)正常位于細胞膜的內側，但在細胞凋亡的早期，PS可從細胞膜的內側翻轉到細胞膜的表面，暴露在細胞外環境中。Annexin-V是一種分子量為35~36KD的Ca2+依賴性磷脂結合蛋白，能與PS高親和力特異性結合... 查看詳情 2022-04-28
常規細胞實驗大匯總~細胞增殖實驗在很多課題中，細胞實驗都是*的。除了之前我們介紹的細胞復蘇、傳代和凍存這“基礎三件套”之外，還有許多常見的操作，需要我們了解甚至是熟練掌握。今天我們就來盤點一下，那些助力高分文章發表的細胞實驗技術（第一期）。細胞增殖實驗MTT法：又稱MTT比色法，是一種檢測細胞存活和生長的方法。檢測原理：活細胞線粒體中的琥珀酸脫氫酶能使外源性MTT還原為水不溶性的藍紫色結晶甲臜（Formazan）并沉積在細胞中，而死細胞無此功能。二甲基亞砜（DMSO）能溶解細胞中的甲臜，用酶聯免疫檢測儀在4... 查看詳情 2022-04-28
細胞凋亡檢測實驗細胞膜是一選擇性的生物膜，一般的生物染料如PI等不能穿過質膜。當細胞壞死時，質膜不完整，PI就進入細胞內部，它可嵌入到DNA或RNA中，使壞死細胞著色，凋亡細胞和活細胞不著色。而一些活細胞染料由于為親脂性物質，可跨膜進入活細胞，因而可進行活細胞染色。Hoechst33342是一種活性熒光染料且毒性較弱，它是雙苯并咪唑的一種衍生物。與DNA特異結合（主要結合于A-T）堿基區），顯示凋亡細胞和活細胞。凡是看到有凋亡小體的細胞都是凋亡細胞。一、試劑準備1.三尖杉酯堿（HT）：300... 查看詳情 2022-04-27
細胞凍存和復蘇實驗細胞凍存及復蘇的基本原則是慢凍快融，實驗證明這樣可以最大限度的保存細胞活力。目前細胞凍存多采用甘油或二甲基亞砜作保護劑，這兩種物質能提高細胞膜對水的通透性，加上緩慢冷凍可使細胞內的水分滲出細胞外，減少細胞內冰晶的形成，從而減少由于冰晶形成造成的細胞損傷。復蘇細胞應采用快速融化的方法，這樣可以保證細胞外結晶在很短的時間內即融化，避免由于緩慢融化使水分滲入細胞內形成胞內再結晶對細胞造成損傷。一、材料準備1.儀器：凈化工作臺、離心機、恒溫水浴箱、冰箱（4℃、-20℃、-70℃）、倒... 查看詳情 2022-04-27

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