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CRISPR基因激活技術,有力揭示干細胞分化過程中的關鍵機理

更新時間:2020-12-09  |  點擊率:1155

日前,來自杜克大學等機構的科學家,開發(fā)了一種新方法能將干細胞轉(zhuǎn)化成為想要的細胞類型。這篇論文名為“Master Regulators and Cofactors of Human Neuronal Cell Fate Specification Identified by CRISPR Gene Activation Screens”,刊登在Cell Reports上。

利用CRISPR基因編輯技術,研究人員識別出哪些轉(zhuǎn)錄因子,可用于制造成熟的成體神經(jīng)元。其實早在2016年,研究者Black等人就報道了一種方法,用以 CRISPR為基礎的基因激活子來開啟基因網(wǎng)絡的表達,從而將成纖維細胞轉(zhuǎn)化成為神經(jīng)元細胞。

研究人員先從多能干細胞開始,對其進行工程化修飾,一旦變?yōu)樯窠?jīng)元細胞,就會發(fā)出紅色熒光。熒光越亮,分化為神經(jīng)元的命運就越強。

隨后研究人員制備出一個導向RNA文庫,這些RNA針對的是所有轉(zhuǎn)錄因子的基因。研究人員向干細胞中引入了CRISPR基因激活劑和導向RNA文庫以便每一種細胞僅能夠接收一種單一的導向RNA,從而開啟特定的基因靶點,隨后研究人員根據(jù)細胞變紅的程度進行分類,并對紅和不紅細胞中的RNAs進行測序,這即能揭示出哪些基因在開啟后對促進分化為神經(jīng)元有益。研究者還揭示出拮抗干細胞分化神經(jīng)元的因子。

從干細胞轉(zhuǎn)化為成熟神經(jīng)元細胞的過程需要7天時間,大大縮短了時間周期,為幫助加速治療神經(jīng)系統(tǒng)疾病和開發(fā)新型檢測技術,提供了很多幫助。

總之,基于CRISPR的基因激活技術對研究人類干細胞轉(zhuǎn)化為具體類型細胞,提供了有力的研究工具。

 

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